在藥品研發(fā)中，如何證實藥品安全有效應(yīng)該是研發(fā)人員始終關(guān)注的問題；而藥品質(zhì)量的穩(wěn)定可控又是保證其安全有效的前提與基礎(chǔ)。如果一個藥品的質(zhì)量不能達(dá)到穩(wěn)定與可控，在使用時這一藥品就不可能始終安全、有效，也就不能被批準(zhǔn)上市。保證藥品質(zhì)量穩(wěn)定可控，藥品的純度是一個重點。如何確定雜質(zhì)的限度是藥學(xué)研究人員與審評人員不能回避的關(guān)鍵問題，該限度的制訂是否科學(xué)、合理，直接關(guān)系到藥品的安全性與質(zhì)量。藥品在臨床使用中產(chǎn)生的不良反應(yīng)除與該藥品本身的藥理活性有關(guān)外，也有一部分與藥品中所混入的其它雜質(zhì)有關(guān)。例如，通過我國藥學(xué)科技工作者數(shù)十年的努力，基本上確定青霉素等抗生素中的多聚物等高分子雜質(zhì)是引起過敏的主要原因。所以在研發(fā)過程中一定要對藥品中的雜質(zhì)進(jìn)行全面研究，并將雜質(zhì)完全準(zhǔn)確地控制在一個合理的范圍之內(nèi)。
  盡管雜質(zhì)限度的確定對于藥品研發(fā)非常重要，但國內(nèi)藥品研發(fā)的現(xiàn)實情況并不令人樂觀。從近幾年的新藥申報情況分析，在雜質(zhì)的研究與限度確定方面存在著較多的問題，主要表現(xiàn)為：部分藥品研究單位對雜質(zhì)研究的重要性了解不深；標(biāo)準(zhǔn)中對雜質(zhì)的控制不夠全面與準(zhǔn)確；制訂雜質(zhì)限度時考慮問題不夠全面，很少考慮雜質(zhì)對藥品安全性的不良影響；即使在雜質(zhì)的含量明顯超出正常工藝所允許的范圍時，也不注意對現(xiàn)有的處方與工藝進(jìn)行必要的優(yōu)化，以降低雜質(zhì)的限度。

  ◆雜質(zhì)的分類　藥品中的雜質(zhì)一般分為三類：有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)及殘留溶劑
  有機(jī)雜質(zhì)是指在藥品的生產(chǎn)與儲存過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)可以是已知的、未知的、揮發(fā)性的或不揮發(fā)性的雜質(zhì)，主要包括：降解產(chǎn)物、聚合物、原料藥與輔料或內(nèi)包材的反應(yīng)產(chǎn)物、以及原料藥制備過程中引入的起始原料、副產(chǎn)物、中間體、反應(yīng)試劑、配位體與催化劑。由于這些雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)與產(chǎn)品分子類似或具淵源關(guān)系，所以通常稱之為有關(guān)物質(zhì)。 　　

  無機(jī)雜質(zhì)是指在藥品的生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)通常是已知的，主要包括：反應(yīng)試劑、配位體與催化劑、重金屬或其它殘留的金屬、無機(jī)鹽、過濾助劑、活性炭等其它物質(zhì)。

  殘留溶劑是指在原料藥及制劑的生產(chǎn)過程中使用的有機(jī)溶劑。 對于生產(chǎn)過程中引入的外來污染物，可通過“良好的生產(chǎn)規(guī)范”（GMP）來控制，故不屬于本文所說的雜質(zhì)范疇。原料藥的不同晶型也不屬于本文的討論范疇。本文只談有機(jī)雜質(zhì)與無機(jī)雜質(zhì)的限度確定。

  ◆有機(jī)雜質(zhì)限度的確定
  總的來說，在制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)的限度時，應(yīng)考慮以下因素：首先是雜質(zhì)的安全性，尤其是對于有藥理活性或毒性的雜質(zhì)；其次是生產(chǎn)的可行性與正常的波動范圍；另外，還要考慮藥品本身的穩(wěn)定性。由于創(chuàng)新藥與仿制藥在研究思路上的差異，雜質(zhì)限度的確定方法也不同。
 

  一、創(chuàng)新藥
  在此，創(chuàng)新藥是指國內(nèi)外均未上市、而完全以自己的研究結(jié)果來申報的新的化學(xué)實體及其制劑。按照新藥研發(fā)的一般模式，此類創(chuàng)新藥的研發(fā)一般需經(jīng)過化合物的合成、藥效學(xué)初篩、較大規(guī)模的合成、毒理研究、制劑研究、臨床研究、原料藥與制劑工藝的優(yōu)化等一系列步驟。雜質(zhì)的研究工作將貫穿于藥品研發(fā)的整個過程，其限度的確定與毒理研究及臨床研究的結(jié)果息息相關(guān)。 　　

  在創(chuàng)新藥的研究中，需通過一系列的藥理毒理及臨床研究來驗證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品就包含一定種類與數(shù)量的雜質(zhì)，如果在這些研究中并未反映出明顯的毒副作用，或經(jīng)分析認(rèn)定該毒副作用與雜質(zhì)無關(guān)，則在安全性方面可認(rèn)為該雜質(zhì)的限度已經(jīng)過了合理的驗證。如果該雜質(zhì)的含量同時也在正常的制備工藝所允許的范圍內(nèi)，則根據(jù)試驗樣品中該雜質(zhì)的含量所確定的限度可認(rèn)為是合理的。并且隨著研究工作的逐步深入，制備工藝的優(yōu)化，產(chǎn)品純度會越來越高。申報上市時雜質(zhì)的限度已遠(yuǎn)低于研究初期雜質(zhì)的含量，再結(jié)合穩(wěn)定性考察中效期末產(chǎn)品的雜質(zhì)情況來確定雜質(zhì)限度，其依據(jù)就比較充分，患者用藥的安全性也就更有保障。 　　

  所以對于創(chuàng)新藥，可通過以下步驟來確定雜質(zhì)的限度。如果在安全性研究與臨床研究中，并未反映出雜質(zhì)具有明顯的毒副作用，則在制定雜質(zhì)限度時只需考慮生產(chǎn)與穩(wěn)定性的結(jié)果。具體如下：首先應(yīng)選用合適的分析方法對所有批次產(chǎn)品的雜質(zhì)進(jìn)行檢測，并完整地記錄各批次樣品的批號與批量、生產(chǎn)日期與地點、生產(chǎn)工藝、單個雜質(zhì)及總雜質(zhì)的含量、產(chǎn)品的用途（如臨床研究，急毒、長毒研究，穩(wěn)定性研究等），對于制劑，還應(yīng)包括原料藥的批號等。為了使以上批次的產(chǎn)品更有代表性，除了要提供所有小試規(guī)模的產(chǎn)品外，至少還應(yīng)包括一定數(shù)量中試規(guī)模的產(chǎn)品，然后對工藝基本穩(wěn)定以后的產(chǎn)品的雜質(zhì)進(jìn)行統(tǒng)計處理，計算出雜質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)偏差值。一般認(rèn)為，標(biāo)準(zhǔn)偏差三倍以內(nèi)的雜質(zhì)含量的變化都在正常的波動范圍內(nèi)。再根據(jù)穩(wěn)定性考察的數(shù)據(jù)確定出雜質(zhì)的限度。只要該限度不大于安全性研究與臨床研究用樣品的雜質(zhì)含量，這一限度就是安全的，也是合理的。 　　

  如果安全性研究或臨床研究反映出雜質(zhì)具有明顯的毒副作用，則該雜質(zhì)的限度將只能根據(jù)安全性研究的結(jié)果制訂，并根據(jù)該雜質(zhì)的來源，采取相應(yīng)的措施盡量降低其含量。 　　

  為了使大家了解國際上對此問題的常規(guī)要求，在此簡單介紹“人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會”（ICH）的有關(guān)指導(dǎo)原則。ICH在2002年2月7日修訂的“新原料藥中的雜質(zhì)”指導(dǎo)原則，根據(jù)原料藥的每日最大劑量將原料藥分為兩類，并分別制訂了雜質(zhì)的報告閾值、鑒定閾值與合理限度。其中的報告閾值是指所有高于此閾值的雜質(zhì)及含量均應(yīng)記入每批產(chǎn)品的檢驗報告中，并反映在申報資料中。而鑒定閾值是指所有高于此閾值的雜質(zhì)均應(yīng)對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。合理限度是指只要質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制訂的雜質(zhì)限度不高于此限度，就不需要提供該限度的制訂依據(jù)，均認(rèn)為該限度是合理的。具體規(guī)定如下：
  每日最大劑量 報告閾值 鑒定閾值 合理限度 
  ≤2g 0.05% 0.10%或1.0mg(取較低值) 0.10%或1.0mg(取較低值)

  >2g 0.03% 0.05% 0.05%  　　

  對于新藥制劑，ICH在2003年2月5日修訂的“新制劑中的雜質(zhì)”指導(dǎo)原則中也做了明確規(guī)定。該指導(dǎo)原則同樣根據(jù)不同的用藥劑量制訂了雜質(zhì)的報告閾值、鑒定閾值與合理限度。

  具體如下：
  報告閾值 
  每日最大劑量閾值 
  ≤1g 0.1% 
  >1g 0.05% 
  鑒定閾值 
  每日最大劑量閾值 
  <1mg1.0%或 5ug (取其中較低的值) 
  1mg-10mg 0.5%或 20ug (取其中較低的值)
  10mg-2g 0.2% 或 2mg (取其中較低的值) 
  >2g 0.10% 
  合理限度 
  每日最大劑量閾值 
  <10mg 1.0%或 50ug (取其中較低的值)
  10mg-100mg 0.5%或 200ug (取其中較低的值)
  100mg-2g 0.2%或 3mg (取其中較低的值)
  >2g 0.15% 

  二、已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品及改劑型藥品 由于已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品及改劑型藥品是在已有同一品種或含有同一活性成分的其它制劑上市的前提下進(jìn)行仿制或研究的，按照我國的藥品注冊管理辦法，根據(jù)具體的注冊分類在申報注冊時，可以免做部分藥理毒理研究及臨床研究，所以在制訂這些藥品的雜質(zhì)限度時，方法與創(chuàng)新藥有所不同。具體可根據(jù)已有標(biāo)準(zhǔn)的不同分為以下四種情況： 　　

  已上市產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中對雜質(zhì)有明確規(guī)定。在仿制時可以按照已有的標(biāo)準(zhǔn)制定雜質(zhì)的限度。但也要注意：不同的合成路線會產(chǎn)生不同的雜質(zhì)；不同的制劑處方與工藝導(dǎo)致產(chǎn)品的穩(wěn)定性也可能不一致；不同輔料的干擾，采用的雜質(zhì)檢測方法也可能不同。在這些情況下就不能簡單地仿標(biāo)準(zhǔn)，而應(yīng)在質(zhì)量研究時進(jìn)行全面的分析：注意考察已有標(biāo)準(zhǔn)中方法是否仍然適用，是否有新的雜質(zhì)產(chǎn)生。為避免因使用不同的合成路線而產(chǎn)生不同的雜質(zhì)，國外在研究仿制藥時，有時會采用反向工程（reverseEngineering）的方式，通過對已上市藥品的雜質(zhì)進(jìn)行研究，推斷其合成路線，然后采用相同的路線制備仿制藥，從而較好地解決了這一問題。 　　

  對于改劑型藥品，仍可根據(jù)同一給藥途徑的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)來制定其雜質(zhì)限度；如無同一給藥途徑的標(biāo)準(zhǔn)，則可參考其它的給藥途徑的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)來制定合理的雜質(zhì)限度。 　　

  已上市產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)中對雜質(zhì)沒有明確規(guī)定。此時一定要注意，此種情況并不意味著該產(chǎn)品的純度不需要控制。在正常情況下，對原料藥來說，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中都應(yīng)有雜質(zhì)控制項目；對制劑，如果制劑用原料藥的雜質(zhì)已有嚴(yán)格的控制，并且在制劑的制備與放置過程中已證明雜質(zhì)的種類與含量均沒有變化，則制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中就可以不再制訂雜質(zhì)檢查項目。當(dāng)然也不排除該產(chǎn)品在研究與技術(shù)審評過程中，因要求不夠嚴(yán)格而沒有按質(zhì)控的要求訂入合適的雜質(zhì)檢查項。 　　

  對于這種情況，就不能簡單地仿標(biāo)準(zhǔn)，而應(yīng)根據(jù)原料藥的雜質(zhì)情況、制劑的制備與穩(wěn)定性考察中雜質(zhì)的種類與含量有無變化等來確定是否有必要在制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制雜質(zhì)。如有必要，則可通過仿產(chǎn)品來確定雜質(zhì)的限度。由于已上市的同品種藥品的質(zhì)量不完全相同，我們在選擇仿制的參考品時，一定要注意所仿制產(chǎn)品的質(zhì)量，必要時可多選擇幾種產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量對比研究?？紤]到已上市產(chǎn)品已在臨床上使用，如無明顯的與雜質(zhì)有關(guān)的毒副作用，其安全性已得到一定程度的臨床驗證，該產(chǎn)品中的雜質(zhì)限度可認(rèn)為是合理的。通過對已上市藥品中的雜質(zhì)進(jìn)行全面分析，以此為依據(jù)來確定仿制藥或改劑型藥的雜質(zhì)限度。一般來說，由于已上市的同品種藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制訂的雜質(zhì)限度要高于產(chǎn)品的實測值，并且產(chǎn)品的原發(fā)廠在進(jìn)行安全性研究時的實際劑量遠(yuǎn)大于規(guī)定的限度，所以根據(jù)FDA指導(dǎo)原則中的有關(guān)規(guī)定，可將在研產(chǎn)品的雜質(zhì)限度設(shè)定為已上市的同品種藥品雜質(zhì)實測值的兩倍以內(nèi)。在此還應(yīng)注意，如果給藥途徑不同，限度可能會有所不同。 　　

  得不到上市產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)。對原料藥來說，由于一般都應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)中控制雜質(zhì)，所以就要通過仿已上市產(chǎn)品來確定雜質(zhì)的限度。對于制劑，則應(yīng)先根據(jù)原料藥的雜質(zhì)情況、制劑的制備與穩(wěn)定性考察中雜質(zhì)的種類與含量有無變化等來確定是否有必要在制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制雜質(zhì)。如有必要，則可通過仿產(chǎn)品來確定雜質(zhì)的限度。 　　

  仿制品或改劑型產(chǎn)品與參考品的雜質(zhì)種類不一致，或雜質(zhì)含量大于已上市的參考品雜質(zhì)的實測值的兩倍。應(yīng)該分析原因，有針對性地對制備工藝與處方等進(jìn)行優(yōu)化，使雜質(zhì)的種類與含量符合要求；或者按照一定程序，通過必要的安全性試驗來證明現(xiàn)有雜質(zhì)的種類與含量是安全的。 　　

  總之，在確定已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品及改劑型藥品的雜質(zhì)限度時，主要的參考依據(jù)應(yīng)該是已上市的產(chǎn)品。在制訂雜質(zhì)限度時只有通過比較全面的論證與研究，所訂的限度才能更科學(xué)合理，產(chǎn)品的安全性才更有保證。

  ◆無機(jī)雜質(zhì)限度的確定
  在雜質(zhì)研究時應(yīng)根據(jù)具體的生產(chǎn)工藝，對原料藥制備過程中涉及到的無機(jī)物進(jìn)行檢測，通常采用藥典方法或其它合適的方法進(jìn)行檢測與定量。根據(jù)整個研發(fā)過程中生產(chǎn)的小試、中試樣品的實測情況，對催化劑、重金屬等無機(jī)雜質(zhì)是否會帶入成品中進(jìn)行評估，并就質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中是否納入這些無機(jī)雜質(zhì)進(jìn)行必要的討論說明，提供相關(guān)的試驗依據(jù)與文獻(xiàn)依據(jù)。　　

  無機(jī)雜質(zhì)的限度主要根據(jù)該雜質(zhì)的毒性及各批次產(chǎn)品的實測結(jié)果而定。如果某些產(chǎn)品的無機(jī)雜質(zhì)在放置過程中會增加，則制訂該雜質(zhì)的限度時，還應(yīng)綜合考慮穩(wěn)定性考察的結(jié)果。 　　

  各國藥典收載的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及我國已批準(zhǔn)上市的產(chǎn)品的注冊標(biāo)準(zhǔn)中包含有各類無機(jī)雜質(zhì)的限度，在這些限度以內(nèi)的無機(jī)雜質(zhì)可以認(rèn)為其安全性已得到了確認(rèn)。因此，這些限度對于我們確定新產(chǎn)品的無機(jī)雜質(zhì)限度具有很強(qiáng)的參考價值。此時要注意根據(jù)新產(chǎn)品的給藥途徑、適應(yīng)癥以及用量等選擇合適的參考標(biāo)準(zhǔn)，以使限度的制訂更為合理